在细胞生物学研究中,对细胞群体进行长期、稳定、可追踪的标记,是理解其行为规律的基础。5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯**(中文名称),英文名称为 Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester(CFDA-SE),正是一款为此类研究量身打造的多功能荧光标记试剂,凭借其独特的理化性质和广泛的应用潜力,已成为实验室中的常用工具。
从化学组成与结构特点来看,CFDA-SE 是一种高度工程化的荧光分子。它以荧光素为母核,在其结构上引入两个乙酰基形成“二乙酸”形式,显著增强了分子的脂溶性,使其能够顺利穿透活细胞的脂质膜。进入细胞后,细胞内的酯酶会特异性地切除乙酰基,转化为带负电荷的羧基荧光素,从而被“锁”在细胞内,避免泄漏。同时,分子末端的琥珀酰亚胺酯基团可与蛋白质或其他含氨基的生物分子发生快速共价结合,进一步提升标记的持久性与特异性。
这一双重机制——“酶解滞留+共价固定”——构成了CFDA-SE的核心优势。与普通荧光染料相比,它不仅标记效率高,而且信号稳定,即使在细胞多次分裂后,仍能清晰追踪子代细胞的分布与增殖情况,是研究细胞动力学的理想选择。
在理化性质方面,CFDA-SE 通常为黄色或浅橙色粉末,可溶于DMSO等有机溶剂,便于配制成储存液。其水解后的产物在可见光区发出明亮的绿色荧光,激发和发射波长与标准FITC滤光片组兼容,无需特殊设备即可检测,极大提升了其实用性。
在应用层面,CFDA-SE 不仅适用于体外细胞共培养体系中的群体区分,还可用于构建细胞迁移模型、评估细胞融合效率,或在组织工程中追踪植入细胞的命运。其高灵敏度和低背景干扰特性,确保了实验数据的可靠性与可重复性。
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